抗體偵測試驗如何運作？

新型冠狀病毒常見的兩種血清診斷方法，分別是酵素結合免疫吸附分析法 (ELISA) 及間接螢光抗體試驗 (IFA)。

直接的 ELISA 法需要抽取病患血液，一般會送往實驗室處理製作血清。⁴ 接著將以形狀類似新型冠狀病毒的固定合成棘蛋白製備多孔培養盤。將血清加入多孔培養盤，IgM 和 IgG 抗體會與抗原結合。未結合的抗體將沖洗去除。其中也會添加化學液體，如果抗體與目標抗原結合就會變色。變色速率與樣本中的抗原專一抗體量成比例關係。色彩濃度可目視評估，或使用免疫分析測讀儀（圖 2 頂端相片）以分光光度法評估。

圖 2： 在直接 ELISA 程序中，變色代表存在抗體。

第二種較為有利的血清診斷方法，則是間接螢光抗體試驗 (IFA)。

IFA 步驟與 ELISA 非常類似。受病毒感染及未受感染的細胞，均固定至載玻片孔之中。和 ELISA 方法一樣，未結合抗體將沖洗去除。IFA 方法是以螢光染料共軛的抗免疫球蛋白，證明一級抗體連結載玻片孔。沖洗去除任何未連結的共軛體後，載玻片會以緩衝甘油覆蓋，並以螢光顯微鏡進行檢驗。其中可評估螢光的形態及位置，以區分專一反應及非專一反應（圖 3）。大部分其他血清試驗並非如此，讓此項特色成為 IFA 方法的主要優勢。⁵

圖 3： 間接的螢光免疫抗體測試。

許多適用於 ELISA 和 IFA 法的免疫分析測讀儀，仰賴酵素反應的螢光或色彩變化，示意圖類似於螢光顯微鏡（圖 4）。支援免疫螢光應用的知名公司包括 BioTek Instruments、Molecular Devices、Essen BioScience 及 Thermo Fisher Scientific 等等。

圖 4： 適用於 ELISA 及 IFA 方法的螢光型或色彩偵測篩選系統光學設計，類似於此項簡易螢光顯微鏡配置。

激發濾光片可讓激發螢光樣本的照明源波長通過。這些激發波長會在二向色濾光片反射，並由透鏡聚焦於樣本上。樣本發出的螢光會穿透通過二向色濾光片，朝向透鏡方向行進，然後由透鏡將光線聚焦於系統探測器。免疫分析測讀儀將透過測量所得的螢光量，判定是否存在 COVID-19 抗體，顯示病患是否帶有病毒。